达所有细胞系中水平最低，并内源性下调-460(460)和-1299(1299)细胞的表达，这两种细胞均表达最高的内源性水平(补充图4和）。

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?采用小鼠尾静脉模型研究细胞的肺定植和生长能力。如图3-和补充图4，上调显著抑制1975细胞在肺中的肿瘤发生，表现为肺结节的形成减少，每m㎡的癌细胞数量减少，累积生存率延长。相反，沉默对460细胞有相反的效果(图3-、和补充图4)。

?值得注意的是，表达的改变不仅影响大肺结节的形成(在分析的肿瘤切片中定义为&am;gt;50肿瘤细胞)(图3)，但也影响小肺结节的形成(在分析的肿瘤切片中定义为5-50个肿瘤细胞)(补充图4)，这支持了在肿瘤细胞的早期定植和随后的肺内生长中都起着重要作用的观点。

?最后，与实验结束时相比，在注射稳定过表达的1975细胞和下调460细胞的小鼠肿瘤组织中，进一步证实了相应的高和低表达水平(补充图4)。

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?然后，采用体内左心室接种小鼠模型检测对远处转移能力的影响，将载体/-1975、过表达-1975、载体/-460和sh#1/-460细胞接种到小鼠左心室。

?接种细胞6周后，收集小鼠的胫骨、脑、肝组织，并进行&am;am;染色处理。如图所示。图3-和补充图4，我们在与载体组相比，过表达小鼠组中，包括骨、大脑和肝脏等远处器官检测到较少的转移性肿瘤，以及较长的累积存活期延长。

?相比之下，沉默可显著增强骨、脑和肝脏转移瘤的形成，并缩短生存期(图3-和补充图4)。

?因此，这些结果表明，低表达的细胞具有更强的局部定植和生长能力，以及更强的远处转移能力。

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?我们利用-8、集落形成和n连接素凋亡进一步研究了在中的生物学功能，发现在正常培养条件下，对细胞的增殖和凋亡能力没有显著影响(补充图5–)。

?我们的结果显示，上调会增加培养液的水平，而沉默会降低培养基的水平，但正常情况下并不影响细胞的表型和数量(补充图5)。

?低表达可能通过营养代谢途径促进细胞对低营养状态的适应，因为即使在正常的含氧条件下，癌细胞也更倾向于通过厌氧途径代谢。

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?然而，上调抑制的生长，而沉默可促进细胞的锚定和悬浮生长能力(图4和)，表明沉默增强了细胞在悬浮条件下的生存能力，即anoikis耐药。这是各种癌症中与远处转移有关的转移性癌细胞的主要特征。

?事实上，昼夜节律基因的失调导致了的代谢失调，广泛参与了多种物质代谢过程，包括脂质和氧化代谢。

?在低血清(1%)和低葡萄糖(1g/)培养液组成的低营养条件下，过表达抑制了

细胞的增殖，但增加了凋亡潜能，反之亦然（图4-）。

?参与了癌细胞生长培养基的营养代谢，这是抑制细胞生长的前提条件。

?在低营养条件下观察细胞对葡萄糖、脂肪酸和蛋白质的影响。如补充图6，表达的改变并不影响总蛋白含量。然而，的上调降低了葡萄糖、甘油三酯的消耗和乳酸的分泌，但增加了游离脂肪酸的水平(图4–)。

?矛盾的是，上调增加了细胞内的总产生和的活性(补充图6和）。这些发现表明，在低营养条件下，过表达的癌细胞更容易发生有氧代谢而不是厌氧代谢，这进一步支持了上调降低乳酸脱氢酶()的活性，厌氧糖酵解限速酶，一些厌氧糖酵解和乳酸发酵相关基因，但增强了多个三羧酸循环相关基因(。

?相反，沉默则表现出相反的代谢特性，促进了细胞的厌氧代谢(图4-和补充图6和)。上诉结果表明，低表达促进非小细胞肺癌细胞的厌氧代谢。

?事实上，即使在氧含量正常的情况下，癌细胞也表现出葡萄糖代谢特征的改变，更倾向于无氧代谢，这一现象被称为“瓦伯格效应”。综上所述，我们的结果表明，低表达可促进细胞从三羧酸循环向厌氧代谢的首选代谢途径的转换，从而进一步促进细胞在低营养条件下的生长。

?为了进一步确定低营养条件下抑制生长和转移的潜在机制，我们将多个信号通路的荧光素酶报告质粒转染到细胞中。如图5所示，上调显著增强了细胞信号活性，抑制了-信号活性;相反，沉默则产生相反的效果(图5)。

?基于数据集中的表达进行了基因集富集分析()，结果显示的表达水平与信号呈正相关，而与-信号呈负相关。根据分析，表达与脂质氧化和糖酵解显著相关(补充图6)。

?重要的是，一些证据表明，通过增加脂解诱导的游离脂肪酸积累，参与的易位和激活，通过破坏65与靶的结合，-信号通路广泛参与了癌症的进展和转移。信号通路由α、β/δ和γ等几个家族成员组成。因此，确定参与抑制-信号通路以及肿
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